人ELISA試劑盒試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在臨床上得到了廣泛的應用，但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大，如不注意，人ELISA試劑盒有可能導致顯色不全、花板等結果。我將操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下，以期給同行帶來一些啟發，提高試驗質量。

 1 選擇試劑 選擇質量優良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。

 2 加樣 可能原因：

 1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣；

 2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長（特別是室內溫度較高時）；

 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。

 解決辦法：

 1）標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，人ELISA試劑盒采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內。

 2）加樣后及時放入孵箱。

 3）加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。

 4） 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。

 5） 標本較多時，請分批操作。

 3 孵育 可能原因：

 1） 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發，吸附于孔壁，難于清洗*；

 2） 孵育時間人為延長，導致非特異性結合緊附于反應孔周圍，難以清洗*。 

解決辦法：

 1） 貼封片或加蓋；

 2） 按說明步驟嚴格控制操作時間。

4 洗板 可能原因：

 1） 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。

 2） 采用半自動洗板機洗板時，人ELISA試劑盒洗液量不足，導致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導致洗板效果差。

 3） 反應板過多造成洗板等待時間長。