技術文章您現在的位置:首頁 > 技術文章 > 蛋白質(酶)的提取
蛋白質(酶)的提取
更新時間:2010-11-11   點擊次數:2333次

大部分蛋白質都可溶于水、稀鹽、稀酸或堿溶液,少數與脂類結合的蛋白質則溶于乙醇、丙酮、丁醇等有機溶劑中,因些,可采用不同溶劑提取分離和純化蛋白質及酶。

 

1.有機溶劑提取法

一些和脂質結合比較牢固或分子中非極性側鏈較多的蛋白質和酶,不溶于水、稀鹽溶液、稀酸或稀堿中,可用乙醇、丙酮和丁醇等有機溶劑,它們具的一定的親水性,還有較強的親脂性、是理想的提脂蛋白的提取液。但必須在低溫下操作。丁醇提取法對提取一些與脂質結合緊密的蛋白質和酶特別*,一是因為丁醇親脂性強,特別是溶解磷脂的能力強;二是丁醇兼具親水性,在溶解度范圍內(度為10%,40度為6.6%)不會引起酶的變性失活。另外,丁醇提取法的pH及溫度選擇范圍較廣,也適用于動植物及微生物材料。

 

2.水溶液提取法

稀鹽和緩沖系統的水溶液對蛋白質穩定性好、溶解度大、是提取蛋白質zui常用的溶劑,通常用量是原材料體積的1-5倍,提取時需要均勻的攪拌,以利于蛋白質的溶解。提取的溫度要視有效成份性質而定。一方面,多數蛋白質的溶解度隨著溫度的升高而增大,因此,溫度高利于溶解,縮短提取時間。但另一方面,溫度升高會使蛋白質變性失活,因此,基于這一點考慮提取蛋白質和酶時一般采用低溫(5度以下)操作。為了避免蛋白質提以過程中的降解,可加入蛋白水解酶抑制劑(如二異丙基氟磷酸,碘乙酸等)。
 

下面著重討論提取液的pH值和鹽濃度的選擇。
1、pH值
  蛋白質,酶是具有等電點的兩性電解質,提取液的pH值應選擇在偏離等電點兩側的pH 范圍內。用稀酸或稀堿提取時,應防止過酸或過堿而引起蛋白質可解離基團發生變化,從而導致蛋白質構象的不可逆變化,一般來說,堿性蛋白質用偏酸性的提取液提取,而酸性蛋白質用偏堿性的提取液。
2、鹽濃度
  稀濃度可促進蛋白質的溶,稱為鹽溶作用。同時稀鹽溶液因鹽離子與蛋白質部分結合,具有保護蛋白質不易變性的優點,因此在提取液中加入少量NaCl等中性鹽,一般以0.15摩爾。升濃度為宜。緩沖液常采用0.02-0.05M磷酸鹽和碳酸鹽等滲鹽溶液。
 

上海通蔚生物科技有限公司

上海通蔚生物科技有限公司

地址:上海市金山區楓涇鎮環東一路65弄2號3463室

主營產品:ELISA檢測試劑盒,ELISA試劑盒,酶聯免疫試劑盒,人ELISA試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,豚鼠ELISA試劑盒,兔ELISA試劑盒,羊ELISA試劑盒,牛ELISA試劑盒,雞ELISA試劑盒,鴨ELISA試劑盒

©2019 版權所有:上海通蔚生物科技有限公司  備案號:滬ICP備14033764號-3  總訪問量:1188901  站點地圖  技術支持:環保在線  管理登陸

主站蜘蛛池模板: 亚洲欧美日韩中文无线码| 国产成人精品999在线观看| 中国一级黄色片子| 最新在线黄色网址| 亚洲精品v天堂中文字幕| 精品国产福利一区二区| 国产亚洲精品成人久久网站| 老妇bbwbbw视频| 在线不卡一区二区三区日韩| 一区二区国产在线观看| 无遮挡一级毛片视频| 亚州一级毛片在线| 欧美成人高清WW| 亚洲香蕉在线观看| 精品剧情v国产在线麻豆| 国产一级一级一级国产片| 国产91小视频| 国产精品va在线观看一| 97久久国产亚洲精品超碰热| 女人把腿给男人桶视频app| 中文国产成人精品久久96| 日本一道dvd在线播放| 五月天丁香在线| 欧美一级视频在线| 亚洲日韩欧洲无码av夜夜摸| 特级毛片a级毛片在线播放www| 免费萌白酱国产一区二区| 美女免费视频一区二区| 国产乱了真实在线观看| 高贵娇妻被多p| 国产成人精品男人的天堂网站| 手机看片国产福利| 国产精品美女一区二区| 99久久精品日本一区二区免费| 女仆胸大又放荡的h| 一本大道道无香蕉综合在线| 成全高清视频免费观看| 中文字幕第6页| 无码一区二区三区免费| 久久久婷婷五月亚洲97号色 | 精品亚洲456在线播放|